【用法与判定】
1 用法
1.1 样品处理及模板准备
推荐采用广州welcometo欢迎光临必发集团生物技术有限公司生产的病毒 DNA/RNA 提取试剂盒,按照说明书进行操作。
1.2 荧光 PCR 扩增
开机预热并检验仪器性能后,取PCR 反应管分别加入5 微升提取好的核酸和阴阳对照,标记后放置在荧光PCR 样品槽相应位置,记录顺序,按下表2 设置扩增参数,进行PCR 扩增。
2 判定
2.1 合理调整阈值线,不同仪器可根据仪器噪音情况进行调整。
2.2 试剂盒有效性判定
·阴性对照:无Ct 值,线形为直线或微斜,无明显指数增长。
·阳性对照:FAM(衣原体)和 HEX(支原体)通道 Ct 值≤30,有明显指数增长,呈典型的S 型曲线。
2.3 样本结果判定
阳性:检测通道 Ct 值≤38,且曲线有明显的指数增长曲线。
可疑:检测通道 38<Ct 值≤40 ,建议重复试验,重复试验结果仍为 38<Ct 值≤40 和明显扩增曲线者为阳性,否则为阴性。
阴性:样本检测结果无 Ct 值且无明显的扩增曲线。
(更详细资料请参照说明书)